Нуклеоли́н — белок, обнаруженный у высших эукариот (животные, растения и дрожжи)[1]. У человека он кодируется геном NCL[2][3], расположенным на 2-й хромосоме в локусе 2q37.1.
Нуклеолин — один из наиболее часто встречающихся ядрышковых белков. Он принимает участие в процессе образования рибосом, но выполняет также функции, не имеющие прямого отношения к ядрышку и протекающему в нём биогенезу рибосом. Способность нуклеолина участвовать во многих клеточных процессах обеспечивается его структурной организацией и возможностью взаимодействовать со многими белками, а также нуклеиновыми кислотами. Нуклеолин играет определённую роль в развитии различных вирусных инфекций, а также при возникновении раковых заболеваний, выступая как онкоген.
Содержание
- 1 Ген
- 2 Структура
- 3 Посттрансляционные модификации
- 4 Функции
- 5 Взаимодействия
- 6 Клиническое значение
- 7 Примечания
- 8 Литература
Ген
Человеческий ген NCL расположен на хромосоме 2 в локусе и состоит из 14 экзонов и 13 интронов общим размером около около 11 килобаз. 11-й интрон гена NCL кодирует малую ядрышковую РНК U20[4].
Механизмы регуляции экспрессии гена нуклеолина изучены плохо. В периферических одноядерных клетках крови, обработанных форболовым эфиром, уровень мРНК NCL повышался под воздействием протеинкиназы ERK[en]. На посттранскрипционном уровне HuR[en] взаимодействует с 3′-нетранслируемой областью мРНК NCL и повышает её трансляцию, а микроРНК miR-494 конкурирует с HuR и подавляет трансляцию. Экспрессию нуклеолина регулируют также микроРНК miR-194 и miR-206[5]. На посттрансляционном уровне количество молекул нуклеолина может регулироваться при помощи протеолиза[6].
Гены, кодирующие нуклеолин, имеются у всех животных, растений и дрожжей. У большинства животных, включая человека, мышь и хомяка, на гаплоидный геном приходится один ген нуклеолина. Однако у тетраплоидных организмов — таких, как сазан Cyprinus carpio и лягушка Xenopus laevis, обнаруживается до трёх генов нуклеолина. У дрожжей тоже имеется один ген нуклеолина: NSR1 у Saccharomyces cerevisiae и GAR2 у Schizosaccharomyces pombe. Напротив, растения имеют по меньшей мере два гена нуклеолина на геном. Структура нуклеолина оказалась высоко консервативной в ходе эволюции[1].
Структура
Нуклеолин был идентифицирован в 1973 году Орриком и коллегами в экстрактах клеток крысы и первоначально получил название C23 из-за своей подвижности в геле двумерного электрофореза?!. Хотя предсказанная масса нуклеолина составляла 77 кДа, оказалось, что данный белок имеет массу 100—110 кДа. Позднее это противоречие было объяснено аминокислотным составом N-концевого домена[1].
У нуклеолина имеется три ключевых структурных домена: N-концевой, центральный и C-концевой. N-концевой домен содержит около 300 аминокислотных остатков. В N-концевом домене располагаются сильно заряженные повторы кислых аминокислот глутамата и аспартата, которые разделяются рядами осно́вных аминокислот. Количество повторов варьирует в зависимости от вида. Благодаря кислым аминокислотам изоэлектрическая точка этого региона относительно низка и составляет 5,5. Кроме того, N-концевые повторы кислых аминокислот обеспечивают аргирофильные свойства нуклеолина. Таким образом, значительная корреляция между интенсивностью окрашивания ядрышка серебром и темпами биосинтеза пре-рибосомной РНК обеспечивается накоплением нуклеолина и другого многочисленного ядрышкового белка, нуклеофозмина. N-концевой домен нуклеолина принимает участие во многих белок-белковых взаимодействиях. Кислые повторы нуклеолина взаимодействуют с гистоном H1[en] и индуцируют деконденсацию хроматина. Благодаря этой особенности нуклеолин можно рассматривать как HGM-подобный белок. Кроме того, N-концевой домен подвергается многочисленным посттрансляционным модификациям; например, он содержит сайты фосфорилирования протеинкиназами Cdk1[en] и CK2[en]*, поэтому предполагают, что N-концевой домен важен для регуляции работы нуклеолина в зависимости от клеточного цикла[7].
Центральный домен нуклеолина содержит четыре (у человека) консервативных РНК-связывающих домена (RBD от англ. RNA Binding Domain или RRM от англ. RNA Recognition Motif[1]), которые обеспечивают специфическое взаимодействие с последовательностями нуклеиновых кислот. Количество RBD в центральном домене варьирует от дрожжей до человека. Интересно, что недавние эксперименты по нокауту показали, что RBD выполняют избыточные функции, и в условиях in vivo специфическая РНК-связывающая[en] активность не нужна для выполнения жизненно важных функций нуклеолина[8].
C-концевой домен нуклеолина обогащён остатками глицина, аргинина и фенилаланина, поэтому его называют GAR- (англ. Glycine- and Arginine-Rich) или RGG- (Arg-Gly-Gly) доменом. Длина С-концевого домена нуклеолина варьирует у разных видов, хотя он довольно консервативен. Показано, что этот домен содержит повторяющиеся β-повороты[en]. Неспецифическое взаимодействие GAR-домена с нуклеиновыми кислотами может играть роль в усилении связывания нуклеолина с РНК посредством RBD. С-концевой домен также принимает участие в белок-белковых взаимодействиях. Многочисленные остатки аргинина этого домена подвергаются посттрансляционному метилированию (в основном встречаются NG,NG-диметиларгинин, однако иногда обнаруживается и NG-монометиларгинин)[8].
Посттрансляционные модификации
Известно, что нуклеолин может подвергаться фосфорилированию, метилированию, АДФ-рибозилированию?! и гликозилированию. Последствия этих модификаций нуклеолина в значительной мере неизвестны[9].
Фосфорилирование
Фосфорилирование — наиболее изученная посттрансляционная модификация нуклеолина, причём у него могут фосфорилироваться разными киназами несколько сериновых и треониновых аминокислотных остатков. Остатки серина, расположенные главным образом вблизи двух очень кислых участков N-концевого домена, фосфорилируются казеинкиназой II (CK2) в ходе интерфазы. В ходе митоза нуклеолин фосфорилируется циклинзависимой киназой 1 (Cdk1) по остаткам треонина, расположенным в осно́вном повторе TPXKK. Было также показано, что нуклеолин является субстратом для протеинкиназы C-ζ[en] (PKC-ζ), PI3K и Rho-ассоциированной протеинкиназы[en]. У растений и дрожжей N-концевое фосфорилирование консервативно[10].
Несмотря на то, что уже с момента своего открытия нуклеолин известен как сильно фосфорилированный белок, функциональная роль этого фосфорилирования ещё в значительной мере неясна. Предполагается, что фосфорилирование нуклеолина влияет на его протеолиз и транскрипцию РНК-полимеразы I[en], а также на внутриклеточную локализацию нуклеолина. Например, у лягушки Xenopus laevis цитоплазматическая локализация нуклеолина совпадает с его обильным фосфорилированием Cdk1, а переход в ядро сопровождается дефосфорилированием. Кроме того, судя по всему, фосфорилирование нуклеолина регулирует его взаимодействие с нуклеиновыми кислотами. В отличие от протеинкиназ нуклеолина, о фосфатазах, регулирующих его статус фосфорилирования, известно гораздо меньше. Было показано, что нуклеолин взаимодействует с тирозинфосфатазой PRL-3. Активность этого фермента необходима для подавления нуклеолина в цитоплазме и его накопления в ядрышке, поэтому считается, что PRL-3 может дефосфорилировать нуклеолин в цитоплазме, регулируя тем самым его локализацию[10].
Метилирование
Нуклеолин содержит довольно много NG,NG-диметиларгинина и следовые количества NG-монометиларгинина. По оценкам, метилированию подвергается одна треть всех остатков аргинина в нуклеолине, что делает нуклеолин одним из наиболее метилируемых ядерных белков. Диметиларгинин может принимать участие в модуляции взаимодействия нуклеолина с нуклеиновыми кислотами. Главным субстратом метилирования является GAR-домен. Асимметричное метилирование может осуществлять протеинаргининметилтрансфераза типа I[en] (PRMT1). Показано, что в клетках рака простаты нуклеолин взаимодействует с PRMT5[en], причём комплекс нуклеолина и PRMT5 содержит симметричный ω-NG,N’G-диметиларгинин. Чтобы проверить, какова роль метилирования GAR-домена в ядрышковой локализации нуклеолина, был создан нуклеолин, у которого 10 остатков аргинина в GAR-домене были заменены на остатки лизина. Такой нуклеолин, хотя и не метилировался дрожжевой метилтрансферазой Hmt1p/Rmt1, оставался в ядрышке, поэтому метилирование остатков аргинина в нуклеолине не влияет на его внутриклеточную локализацию[11].
АДФ-рибозилирование и гликозилирование
Показано, что в растущих экспоненциально клетках HeLa нуклеолин может модифицироваться при помощи АДФ-рибозилирования, однако какие именно остатки подвергаются модификации, неизвестно[12].
В центральном домене нуклеолина пять остатков могут подвергаться N-гликозилированию[en] в последовательностях Asn-Xaa-Ser и Asn-Xaa-Thr. Небольшая доля нуклеолина, найденная на поверхности клеток различных типов, может подвергаться N- и O-гликозилированию[en]. Было выявлено два сайта гликозилирования: N317 и N492, расположенные в RBD1 и RBD3 соответственно. Ингибирование N-гликозилирования путём обработки клеток туникамицином[en] предотвращает экспрессию нуклеолина на поверхностях клеток, поэтому эта посттрансляционная модификация совершенно необходима для правильной внутриклеточной локализации белка. Поскольку поверхностный нуклеолин служит рецептором для различных внеклеточных лигандов, которые принимают участие в пролиферации, дифференцировке, адгезии, митогенезе[en]* и ангиогенезе, возможно, гликозилирование нуклеолина необходимо для этих взаимодействий[12].
Функции
Нуклеолин — многофункциональный белок, который играет важную роль не только в биогенезе рибосом, но также в транскрипции, опосредуемой РНК-полимеразой II, метаболизме ДНК и пролиферации клеток[13]. Ниже рассматриваются отдельные функции нуклеолина.
Транскрипция, опосредованная РНК-полимеразой I
С самого открытия нуклеолин связывали с хроматином. Действительно, нуклеолин может взаимодействовать с различными последовательностями ДНК, а также гистонами H1, H3[en] и H4[en]. Это свидетельствует, что нуклеолин может играть важную роль в регуляции структуры и функций хроматина, причём особенно это важно для транскрипции генов рРНК (рДНК) РНК-полимеразой I. Имеются свидетельства, что нуклеолин может как активировать, так и подавлять транскрипцию, опосредованную РНК-полимеразой I. Так, в клетках слюнных желёз комара Chironomus tentans синтез пре-рРНК ускорялся в 2,5—3 раза при инъекции антител к нуклеолину. У карпа Cyprinus carpio репрессия транскрипции рДНК связана с повышением уровня нуклеолина, а в ооцитах лягушки Xenopus laevis уровень 40S пре-рРНК значительно понижался после инъекции нуклеолина лягушки или хомяка. Но при этом в линии клеток курицы DT40 нехватка нуклеолина подавляет транскрипцию рДНК. У человека нуклеолин необходим для транскрипции рДНК в условиях in vivo. Нокдаун нуклеолина в клетках HeLa и человеческих фибробластах снижает транскрипцию, проводимую РНК-полимеразой I, при этом сверхэкспрессия нуклеолина в клетках HeLa приводила к повышению транскрипции рДНК. Фосфорилирование нуклеолина сопровождается повышением транскрипции рДНК. Кроме того, нуклеолин повышает активность двух хорошо исследованных комплексов ремоделирования хроматина: SWI/SNF[en] и комплекса ACF[en]. Нуклеолин способствует взаимодействию SWI/SNF с нуклеосомой. Помимо активации ремоделирования хроматина, нуклеолин может дестабилизировать нуклеосомы и тем самым активируя замещение димера Н2А-Н2В. Известно также, что делеция нуклеолина приводит к существенной перестройке ядрышка. Всё это свидетельствует о том, что нуклеолин влияет на транскрипцию, опосредованную РНК-полимеразой I[14].
Созревание рРНК и сборка пре-рибосом
Судя по всему, нуклеолин является ключевым участником процессинга пре-рРНК и сборки пре-рибосом. В частности, нуклеолин играет важнейшую роль в первой стадии процессинга рРНК у мышей. Взаимодействие нуклеолина с пре-рРНК необходимо для процессинга рРНК в условиях in vitro. Так, нуклеолин взаимодействует с малым ядрышковым рибонуклеопротеином U3[en], который необходим для первого разреза в процессинге пре-рРНК. Нуклеолин также может участвовать в сборке пре-рибосом. Нуклеолин временно связывается с появляющимися пре-рибосомными частицами и пре-рРНК и, вероятно, служит РНК-шапероном, направляющим укладку пре-рРНК при транскрипции. Правильная котранскрипционная укладка необходима для правильных взаимодействий с рибосомными белками[en] и образования правильно уложенных пре-рибосом. Таким образом, участвуя в котранскрипционной укладке пре-рРНК, нуклеолин обеспечивает связь между транскрипцией, проводимой РНК-полимеразой I, и сборкой пре-рибосом. Поскольку нуклеолин курсирует между ядром и цитоплазмой, он может участвовать в импорте цитоплазматических факторов сборки пре-рибосом (таких, как рибосомные белки) в ядро. Действительно, нуклеолин взаимодействует с некоторыми рибосомными белками через домен RGG. Однако, так как нуклеолин не содержится в зрелых цитоплазматических рибосомах, он высвобождается из пре-рибосомного комплекса при его созревании[15].
Транскрипция, опосредованная РНК-полимеразой II
Имеются данные, что нуклеолин участвует в регуляции транскрипции, опосредованной не только РНК-полимеразой I, но и РНК-полимеразой II. Обычно он активирует экспрессию генов, транскрибируемых РНК-полимеразой II, но может осуществлять и репрессию транскрипции. Например, было показано, что нуклеолин выступает главным репрессором гена кислого гликопротеина α-1 (AGP). Нуклеолин также необходим для регуляции транскрипции KLF2[en]. Нуклеолин связывается с промотором этого гена, регулируя его экспрессию. Нокдаун нуклеолина при помощи малых интерферирующих РНК (siРНК) подавляла индукцию экспресии KLF2 в условиях напряжения сдвига[16].
Посттранскрипционная регуляция
Судя по всему, благодаря своей способности связываться с РНК нуклеолин может участвовать в посттранскрипционной регуляции экспрессии генов, взаимодействуя с РНК непосредственно. Действительно, имеются сведения, что нуклеолин может принимать участие в стабилизации мРНК. Например, он может стабилизировать мРНК интерлейкина 2 (IL-2) при активации Т-клеток, а также определять время полужизни мРНК генов Bcl-XL[en] and bcl-2, взаимодействуя с ARE в 3′-нетранслируемой области. Нуклеолин также может регулировать трансляцию мРНК. Так, он может регулировать уровни белка p53 в условиях in vivo. Показано, что сверхэкспрессия нуклеолина подавляла трансляцию р53, а понижение уровня нуклеолина стимулирует трансляцию р53. Повышение уровня р53 при нокдауне нуклеолина можно объяснить ядрышковый стресс, вызванный нехваткой нуклеолина. Кроме того, показано, что нуклеолин может с высоким сродством связываться с мРНК некоторых селенопротеинов, при этом нехватка нуклеолина не отражается на количестве транскриптов селенопротеинов, поэтому, видимо, нуклеолин может селективно регулировать экспрессию некоторых селенопротеинов на уровне трансляции[17].
Метаболизм ДНК
Способность нуклеолина связываться как с ДНК, так и с белками, участвующими в метаболизме ДНК (репликации, репарации и рекомбинации), даёт право предполагать, что нуклеолин принимает определённое участие в этих процессах. Нуклеолин может быть частью машинерии репликации ДНК; например, предполагается, что нуклеолин может иметь ДНК-хеликазную активность, хотя эти данные спорны. Было высказано предположение, что в условиях стресса нуклеолин может принимать участие в остановке репликации ДНК, образуя комплекс с репликативным белком А (RPA). RPA может связываться с одноцепочечной ДНК и играет важную роль в таких процессах метаболизма ДНК, как репликация, эксцизионная репарация нуклеотидов и гомологичная рекомбинация. Интересно, что в условиях теплового шока[en] начинается р53-зависимое перераспределение нуклеолина между ядрышком и нуклеоплазмой, и это перемещение сопровождается повышением образования комплекса нуклеолина с р53. При связывании с нуклеолином RPA теряет способность способствовать репликации ДНК, поэтому связывание нуклеолина с RPA предотвращает взаимодействие RPA с другими факторами. Показано, что нуклеолин может связываться с теломерными повторами в условиях in vitro, а также с теломеразой in vivo и in vitro, поэтому нуклеолин может играть роль в репликации и поддержании теломер, обеспечивая связь между ядрышком и теломерами. Нуклеолин может непосредственно взаимодействовать с белками, участвующими в репарации ДНК и рекомбинации — например, с p53, YB-1[en], RPA, PCNA[en], Rad51[en] и топоизомеразой I[en][18].
Регуляция клеточного цикла и пролиферации
Экспрессия нуклеолина связана с темпами пролиферации клеток. Так, в опухолях и других быстро делящихся клетках уровни синтеза нуклеолина очень высоки, в то время как в неделящихся клетках нуклеолин синтезируется на низком уровне. Экспрессия нуклеолина активируется в средней и поздней G1-фазе, поэтому предполагают, что нуклеолин необходим для прохождения G1-фазы клеточного цикла. Таким образом, нуклеолин может служить маркером клеточной пролиферации. С регуляцией пролиферации также связаны посттрансляционные модификации и контролируемый протеолиз нуклеолина. Продукты разрушения нуклеолина могут стимулировать автолитические эндонуклеазы, которые фрагментируют ДНК[en], вызывая апоптоз. В неделящихся клетках нуклеолин может стимулировать собственное разрушение, причём в делящихся клетках, по-видимому, существует ингибитор, предотвращающий разрушение нуклеолина. Фосфорилирование нуклеолина связано с усиленной пролиферацией клеток. Предполагается, что фосфорилирование нуклеолина киназами CK2 и Cdk1 может быть механизмом, регулирующим клеточный цикл и деление. Нокдаун нуклеолина при помощи siРНК в клетках HeLa и человеческих первичных фибробластов приводил к снижению роста клеток, повышению апоптоза и остановке клеток в G2-фазе, причём возрастало количество многоядерных клеток и клеток с микроядрами. Кроме того, нехватка нуклеолина приводит к увеличению количества центросом и образованию мультиполярного веретена[19].
Взаимодействия
Взаимодействие с нуклеиновыми кислотами
Ещё до описания необходимых доменов было известно, что нуклеолин обладает способностью связываться с нуклеиновыми кислотами. Изучение взаимодействия нуклеолина с пре-рибосомной РНК позволило выделить два ключевых РНК-мотива в пре-рРНК, которые являются мишенями нуклеолина. Первый такой мотив называется NRE (англ. nucleolin recognition element). Он образует шпильку, петля которой имеет консенсусную последовательность?! UCCCGA. Для взаимодействия нуклеолина с этим доменом необходимо совместное действие первых двух RBD. Подобные шпильки располагаются по всей пре-рРНК, и связывание с ними нуклеолина обеспечивает правильную укладку пре-рРНК, необходимо для его процессинга и сборки пре-рибосомных частиц. Второй мотив пре-рРНК, с которым может связываться нуклеолин, называется ECM (англ. evolutionary conserved motif). Взаимодействие нуклеолина с этой короткой последовательностью, располагающейся сразу после первого сайта разрезания пре-рРНК, требует всех четырёх RBD. Оно необходимо для сборки процессирующего комплекса, осуществляющего первый разрез пре-рРНК[20].
В ряде исследований показано, что нуклеолин способен специфично взаимодействовать также с 3′-нетранслируемыми областями некоторых мРНК, влияя на её стабильность. Например, взаимодействие нуклеолина с некоторыми элементами SECIS, которые содержат шпилечные структуры в 3′-нетранслируемых областях некоторых мРНК, необходимо для оптимальной экспрессии некоторых селенопротеинов. Кроме того, известно, что нуклеолин может взаимодействовать с 5′-нетранслируемой областью p53, влияя на эффективность его трансляции. Сверхэкспрессия нуклеолина отрицательно влияет на образование p53, а пониженная экспрессия нуклеолина приводит к повышению экспрессии p53[20].
Нуклеолин может связываться с различными последовательностями ДНК. Например, он может связываться с денатурированной одноцепочечной ДНК и некоторыми вирусными ДНК. Общим свойством последовательностей ДНК, с которыми может связываться нуклеолин, является их обогащение гуанозином, как, например, обогащённые гуанозином олигонуклеотиды, найденные в межгенных спейсерах рДНК, в теломерной ДНК, а также в переключательных участках генов иммуноглобулинов. Обогащённые гуанозином олигонуклеотиды имеют склонность образовывать G-квадруплексы, с которыми также может связываться нуклеолин[21]. Так происходит, в частности, с геном, кодирующим фактор роста сосудистого эндотелия, а также с промотором гена c-myc. Взаимодействие нуклеолина с промотором c-MYC подавляет транскрипцию этого гена[22].
Взаимодействие с белками
Поскольку нуклеолин находится в основном в ядрышке и участвует в сборке пре-рибосомных частиц, неудивительно, что он взаимодействует с рядом рибосомных белков. Для этих взаимодействий важны RGG- и N-концевые домены. В клетках линии HEK 293 нуклеолин был найден связанным с рибонуклеопротеиновыми комплексами, состоящими в основном из рибосомных белков. Нуклеолин задействован во многих белок-белковых взаимодействиях, которые играют жизненно важную роль в метаболизме ДНК. Так, нуклеолин взаимодействует с N-концевым участкок топоизомеразы I, репликативным белком A, p53, YB-1, PCNA, субъединицей UL44 ДНК-полимеразы человеческого цитомегаловируса, белком NS5B вируса гепатита C, белком NS1 вируса гриппа А[en]. Кроме того, были описаны взаимодействия нуклеолина с различными белками, зависимые от клеточного цикла. Нуклеолин и нуклеофозмин взаимодействуют друг с другом во время интерфазы и цитокинеза, но не прометафазы и метафазы. Значение этого взаимодействия неизвестно. В ходе фазы G1 образуется комплекс нуклеолина с белком ретинобластомы (Rb) с участием ингибиторного домена Rb. Показано, что взаимодействие Rb с нуклеолином подавляет ДНК-связывающую[en] активность последнего. Кроме того, в эпителиальных клетках внутриклеточное распределение нуклеолина зависит от Rb, и утрата Rb при раке приводит к изменённой внутриклеточной локализации нуклеолина. Показано, что нуклеолин выступает рецептором для нескольких белков — например, для фактора роста мидкина (MK) и плейотрофина[en] (PTN), который подавляет ВИЧ-инфекцию. Было высказано предположение, что нуклеолин является рецептором для эндостатина, и, более того, нуклеолин опосредует антиангиогенную и противоопухолевую активность эндостатина. Было установлено, что нуклеолин влияет на димеризацию ErbB[en]. Для взаимодействия с ErbB1 и белками Ras необходим С-концевой домен нуклеолина. Связывание нуклеолина с другими белками может влиять на их внутриклеточную локализацию. Например, так обстоит дело с белком GZF1 и теломеразой[23].
Клиническое значение
Вирусные заболевания
Нуклеолин влияет на несколько аспектов вирусных инфекций — такие, как прикрепление вируса к клетке-хозяину, внедрение генетического материала вируса внутрь клетки, а также использование клетки-хозяина для образования вирусных белков. Нуклеолин необходим для проникновения вируса парагриппа человека типа 3 (HPIV3) в клетки эпителия лёгких. Кроме того, он служит рецептором для респираторного синцитиального вируса (RSV) человека. Синтетический пептид HB-19, являющийся специфичным антагонистом С-концевого домена RGG нуклеолина, подавляет прикрепление ВИЧ к клеткам. Кроме того, нуклеолин участвует в инфекции вируса гепатита С, вируса простого герпеса типа 1, вируса гриппа А[24][25], вируса синдрома белых пятен[en] (англ. white-spot syndrome virus), а также вируса геморрагической лихорадки Крым-Конго. Нуклеолин образует рибонуклеопротеин с 3′-нетранслируемой областью кошачьего калицивируса[26] и вируса Норуолк (англ. Norwalk virus). Связь нуклеолина с IRES в 5′-нетранслируемой области полиовируса и риновируса стимулирует экспрессию вирусных белков in vivo и in vitro[6].
Рак
Как отмечалось выше, нуклеолин интенсивно экспрессируется в быстро делящихся клетках — таких, как стволовые и раковые клетки. Онкогенный эффект нуклеолина, по-видимому, имеет много факторов, что согласуется с его разнообразными функциями. Нуклеолин модулирует экспрессию нескольких белков, которые влияют на выживаемость раковых клеток при наличии повреждений. Так, нуклеолин связывается с мРНК BCL2 и стимулирует экспрессию протоонкогена Bcl-2, который блокирует апоптоз. Он также связывается с мРНК и стимулирует транскрипцию другого белка, который регулирует выживаемость клеток — AKT1. Как было указано выше, нуклеолин уменьшает экспрессию важного противоопухолевого белка — р53. Нуклеолин также положительно регулирует гастрин — белок, который активно экспрессируется при раке желудка и кишечника и стимулирует пролиферацию и миграцию раковых клеток, а также ангиогенез. Поскольку нуклеолин взаимодействует с теломеразой, он может влиять на отсутствие старения у раковых клеток. Нуклеолин усиливает образование белков, которые отвечают за разрушение внеклеточного матрикса, а значит, повышает способность раковых клеток к миграциям и метастазированию. Кроме того, нуклеолин стимулирует транскрипцию фактора роста сосудистого эндотелия (VEGF), а также регуляторного фактора интерферона-2[en] (IRF-2). Оба эти белка активно экспрессируются в раковых клеток и могут регулировать рост последних. Нуклеолин, располагающийся у поверхности клетки, служит рецептором для факторов, стимулирующих рост опухолей[6].
В таблице ниже представлены основные онкогенные эффекты нуклеолина[27].
| Стадия | Эффект | Механизм |
|---|---|---|
| Канцерогенез | Способствует | Регулирует и усиливает сигнальные пути TGFβ и EGF. |
| Пролиферация и выживание | Способствует | Взаимодействует с белками репарации ДНК и поддерживает её стабильность. Регулирует стабильность мРНК белков, регулирующих апоптоз, способствуя отмене апоптоза. Связывает лиганды, стимулирующие апоптоз |
| Инфильтрация и метастазирование | Способствует | Регулирует разборку внеклеточного матрикса, регулирует сигнальные пути EGFR и CXCR4?! |
| Ангиогенез | Способствует | Повышает уровни VEGF и HIF1α?! |
Нуклеолин является мишенью многих противораковых препаратов[6]. Нуклеолин может использоваться для диагностики некоторых раковых заболеваний[28]; например, по характеру экспрессии нуклеолина можно определить в крови циркулирующие клетки рака предстательной железы[29].
Примечания
- ↑ 1 2 3 4 Durut N., Sáez-Vásquez J. Nucleolin: dual roles in rDNA chromatin transcription. (англ.) // Gene. — 2015. — Vol. 556, no. 1. — P. 7—12. — doi:10.1016/j.gene.2014.09.023. — PMID 25225127. [исправить]
- ↑ Srivastava M., McBride O. W., Fleming P. J., Pollard H. B., Burns A. L. Genomic organization and chromosomal localization of the human nucleolin gene. (англ.) // The Journal of biological chemistry. — 1990. — Vol. 265, no. 25. — P. 14922—14931. — PMID 2394707. [исправить]
- ↑ Erard M. S., Belenguer P., Caizergues-Ferrer M., Pantaloni A., Amalric F. A major nucleolar protein, nucleolin, induces chromatin decondensation by binding to histone H1. (англ.) // European journal of biochemistry. — 1988. — Vol. 175, no. 3. — P. 525—530. — PMID 3409881. [исправить]
- ↑ Entrez Gene: NCL nucleolin (неопр.).
- ↑ Bose S., Tholanikunnel T. E., Reuben A., Tholanikunnel B. G., Spicer E. K. Regulation of nucleolin expression by miR-194, miR-206, and HuR. (англ.) // Molecular and cellular biochemistry. — 2016. — Vol. 417, no. 1-2. — P. 141—153. — doi:10.1007/s11010-016-2721-2. — PMID 27221739. [исправить]
- ↑ 1 2 3 4 Abdelmohsen K., Gorospe M. RNA-binding protein nucleolin in disease. (англ.) // RNA biology. — 2012. — Vol. 9, no. 6. — P. 799—808. — doi:10.4161/rna.19718. — PMID 22617883. [исправить]
- ↑ The Nucleolus, 2011, p. 186—187.
- ↑ 1 2 The Nucleolus, 2011, p. 187.
- ↑ The Nucleolus, 2011, p. 191.
- ↑ 1 2 The Nucleolus, 2011, p. 191—192.
- ↑ The Nucleolus, 2011, p. 192—193.
- ↑ 1 2 The Nucleolus, 2011, p. 193.
- ↑ The Nucleolus, 2011, p. 194.
- ↑ The Nucleolus, 2011, p. 194—196.
- ↑ The Nucleolus, 2011, p. 196—197.
- ↑ The Nucleolus, 2011, p. 198.
- ↑ The Nucleolus, 2011, p. 199.
- ↑ The Nucleolus, 2011, p. 199—201.
- ↑ The Nucleolus, 2011, p. 201—203.
- ↑ 1 2 The Nucleolus, 2011, p. 188—189.
- ↑ Lago S., Tosoni E., Nadai M., Palumbo M., Richter S. N. The cellular protein nucleolin preferentially binds long-looped G-quadruplex nucleic acids. (англ.) // Biochimica et biophysica acta. — 2016. — doi:10.1016/j.bbagen.2016.11.036. — PMID 27913192. [исправить]
- ↑ The Nucleolus, 2011, p. 189.
- ↑ The Nucleolus, 2011, p. 189—190.
- ↑ Kumar D., Broor S., Rajala M. S. Interaction of Host Nucleolin with Influenza A Virus Nucleoprotein in the Early Phase of Infection Limits the Late Viral Gene Expression // PLoS ONE. — 2016. — Vol. 11, no. 10. — P. e0164146. — doi:10.1371/journal.pone.0164146. — PMID 27711134. [исправить]
- ↑ Terrier O., Carron C., De Chassey B., Dubois J., Traversier A., Julien T., Cartet G., Proust A., Hacot S., Ressnikoff D., Lotteau V., Lina B., Diaz J. J., Moules V., Rosa-Calatrava M. Nucleolin interacts with influenza A nucleoprotein and contributes to viral ribonucleoprotein complexes nuclear trafficking and efficient influenza viral replication. (англ.) // Scientific reports. — 2016. — Vol. 6. — P. 29006. — doi:10.1038/srep29006. — PMID 27373907. [исправить]
- ↑ Hernández B. A., Sandoval-Jaime C., Sosnovtsev S. V., Green K. Y., Gutiérrez-Escolano A. L. Nucleolin promotes in vitro translation of feline calicivirus genomic RNA. (англ.) // Virology. — 2016. — Vol. 489. — P. 51—62. — doi:10.1016/j.virol.2015.12.001. — PMID 26707270. [исправить]
- ↑ Chen Z., Xu X. Roles of nucleolin. Focus on cancer and anti-cancer therapy. (англ.) // Saudi medical journal. — 2016. — Vol. 37, no. 12. — P. 1312—1318. — doi:10.15537/smj.2016.12.15972. — PMID 27874146. [исправить]
- ↑ Li H., Bai X., Wang N., Chen X., Li J., Zhang Z., Tang J. Aptamer-based microcantilever biosensor for ultrasensitive detection of tumor marker nucleolin. (англ.) // Talanta. — 2016. — Vol. 146. — P. 727—731. — doi:10.1016/j.talanta.2015.06.034. — PMID 26695322. [исправить]
- ↑ Chalfin H. J., Verdone J. E., van der Toom E. E., Glavaris S., Gorin M. A., Pienta K. J. Nucleolin Staining May Aid in the Identification of Circulating Prostate Cancer Cells. (англ.) // Clinical genitourinary cancer. — 2017. — doi:10.1016/j.clgc.2016.12.004. — PMID 28153390. [исправить]
Литература
- Proteins of the Nucleolus. Regulation, Translocation, & Biomedical Functions / Ed. by Danton H. O’Day, Andrew Catalano. — Dordrecht: Springer Science+Business Media, 2013. — vi + 371 p. — ISBN 978-94-007-5818-6. — doi:10.1007/978-94-007-5818-6.
- The Nucleolus / Ed. by Mark O. J. Olson. — New York: Springer Science+Business Media, 2011. — xxvi + 414 p. — (Protein Reviews, vol. 15). — ISBN 978-1-4614-0514-6. — doi:10.1007/978-1-4614-0514-6.
| Эта статья входит в число хороших статей русскоязычного раздела Википедии. |
